然而，1940年5月，周恩來從莫斯科回國，帶來了季米特洛夫希望盡力保持國共合作局面的意見。6月，法國戰敗，英國本土開始受到進攻，英、法失去了干預東方事務的可能性。注意到這種情況，毛澤東估計蔣介石將“被迫讓步”，“在不妨礙其階級利益即政權的範圍內，延長合作抗日時間”。因此，他同意為減少軍事磨擦，與國民黨進行劃界談判。他明確表示：“爭取劃界，我們不超出界外，避免同國民黨引起大的衝突，以減少國民黨的恐懼情緒，爭取抗戰時間的延長”。
相信以蔣介石為代表的中國帶買辦性的大資產階級是靠英法等帝國主義的支持而存在的，這是毛澤東在英法兩國失去東顧能力之後判斷蔣介石必定要向共產黨妥協的基本依據。然而，7月16日，國民黨提出所謂《中央提示案》，明確規定八路軍、新四軍必須在一個月之內全部開赴舊黃河以北，並且只允許八路軍編六個師，新四軍編兩個師，其餘數十萬部隊一律遣散。這不能不讓毛澤東再度深感困惑。
8月16日，中共中央召開會議分析國際局勢，會上已經開始提到蔣介石有沒有轉向日本尋求和平可能的問題。但這也僅僅是推測而已，並沒有什麼可靠的憑證。因此，毛澤東固然同意劃界，但強調必須以新黃河為線，並且新四軍實際上不能向北集中。殊不料條件提出後，國民黨竟毫無商量餘地。當新四軍江北陳毅部在八路軍黃克誠部援助下，反擊韓德勤八十九軍的壓迫大獲成功，殲敵三旅之眾，在華中形成了大片根據地，國民黨方面老羞成怒，一面發布密令監視周恩來等，並準備密捕四川所有中共人員，一面於10月19日以何（應欽）、白（崇禧）皓電的形式，幹脆發出最後通牒，限令中共軍隊於一個月內按《中央提示案》要求全部開赴舊黃河以北的指定地區。
在共產黨已經強大到有50餘萬軍隊、60萬黨員、控制著華北敵後的大部分地區和華中部分地區的情況下，蔣介石到底有什麼資本能夠向共產黨下最後通牒呢？難道是因為9月27日德、意、日三國結成軍事同盟，蔣介石想步汪精衛的後塵？但是，毛澤東還是懷疑，作為英美派大資產階級代表的蔣介石，是否真的會那麼輕易地離開英美集團去加入德意日集團。
10月中旬，中共中央相繼得到消息，美國已經提供給蔣介石一筆2500萬美元的貸款，英國也開放了一度因受日本壓迫而關閉的滇緬路，以便利向中國運送抗戰物資。周恩來亦多次來電強調蔣介石國民黨加入英美集團的可能，並判斷，如英美集團戰勝，則國內形勢將更形逆轉。南方局20日發回的政治情報也斷定：蔣介石還是英美派，其加緊反共反蘇，是“放棄獨立戰爭，加入英美同盟的具體準備步驟”。
毛澤東早就贊同這一判斷，並在10月12日就有電報說明：“蔣在英美策動下可能加入英美戰線”。但進至10月下旬，注意到蔣介石確有動武可能，他又不能不對前此的判斷有所疑惑，而認為大資產階級未必會馬上加入英美集團。
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